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試劑盒
首頁 食品安全快速檢測 糧油及飼料 嘔吐毒素ELISA快速檢測試劑盒

嘔吐毒素ELISA快速檢測試劑盒

檢測項目:真菌毒素

適用樣本:飼料、飼料原料、糧油

規格
96T/盒
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產品介紹
概述

概要?

脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DeoxynivaLenoL)又稱嘔吐毒素 (Vomitoxin)屬于霉菌的單端孢菌素族,由某些鐮刀霉真菌屬產生。嘔吐毒素多分布于小麥、大麥、玉米等谷物籽實樣本中,由于其具有強的細胞毒性及免疫抑制性質,對人類及動物的健康構成威脅。?

本試劑盒是應用ELISA最新技術研發而成的毒素檢測產品,與儀器分析技術相比具有快速、簡便、準確和靈敏度高等優點,操作時間需20min,能減少工作強度和操作誤差。?


實驗原理?

本試劑盒采用間接競爭ELISA 方法,在酶標板微孔上預包被嘔吐毒素抗原,樣本中的嘔吐毒素和微孔上預包被的抗 原競爭嘔吐毒素抗體(抗試劑),同時嘔吐毒素抗體與酶標二抗(酶標物)相結合,經TMB 底物顯色,樣本吸光度值與其所含嘔吐毒素含量呈負相關,與標準曲線比較再乘以其對應的校準系數,即可得出樣本中嘔吐毒素的含量。?


貯藏條件及有效期?

貯藏條件:保存試劑盒于 2~8℃。?

有效期:該產品有效期為 12 個月。

檢測步驟

1、將所需試劑從冷藏環境中取出,置于室溫(20~25℃)平 衡 1h 以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。?

2、取出需要數量的微孔板,將不用的微孔板放進原錫箔袋中 并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于 2~8℃。切 勿冷凍。?

3、洗滌液在使用前也需回溫。?

4、請注意反應溫度不宜過高,控制溫度在 20~25℃。?

5、編號:將樣本和標準品對應微孔按序編號,每個樣本和標 準品做 2 孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置(建 議在一次實驗過程中,若使用 8 道移液器則標準品和樣本 的總量不宜超過 48 個,即不宜超過 6 個檢測條;建議若 使用單道移液器則不宜超過 16 個,即不宜超過 2 個檢測 條)。?

6、加標準品/樣本:加入標準品或樣本 50μL 到對應的微孔中, 加酶標物 50μL /孔,再加入抗試劑 50μL /孔(加抗試劑時 請使用多道移液器),輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置 25℃避光環境中反應 15min。?

7、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內液體甩干,用洗滌液 250μL /孔,充分洗滌 4~5 次,每次間隔 10s,在吸水紙上拍干(拍 干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。?

8、顯色:加入底物液 100μL /孔(加底物液時請使用多道移 液器),用蓋板膜蓋板后置 25℃避光環境反應 5min。?

9、測定:加入終止液 50μL /孔(加終止液時請使用多道移液 器),輕輕振蕩混勻,設定酶標儀于 450nm 處(建議用 雙波長 450/630nm 檢測,請在 5min 內讀完數據),測定 每孔 OD 值。

注意事項
1. 試劑及樣本沒有回到室溫(20~25℃)會導致所有標準的 OD 值偏低。 2. 在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況,則會出現標準曲 線不成線性,重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即 進行下一步操作。 3. 每加一種試劑前需將其搖勻。 4. 反應終止液為 2M 硫酸,避免接觸皮膚。 5. 不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期 的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會 引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試 劑。 6.儲存條件:保存試劑盒于 2~8℃,不要冷凍,將不用的酶標板微孔板 放進錫箔袋重新密封。標準物質和無色的發色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。 7. 試劑變質的跡象:發色試劑有任何顏色表明發色劑變質,應當棄之。0 標準 的吸光度(450/630nm)值小于 0.5(A450nm<0.5)時,表示 試劑可能變質。 8. 加入底物液后,一般顯色時間為 5min。若顏色較淺,可延長反應時間到 7min。反之,則減短反應時間。 9. 濃縮洗滌液如有結晶屬正?,F象,請加熱溶解后使用。 10. 該方法為篩選方法,如遇陽性樣本請用確證方法確認。 11. 該試劑盒最佳反應溫度為 25℃,溫度過高或過低將導致 檢測吸光度值和靈敏度發生變化。
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